莺歌凤梨的离体培养和快速繁殖

1. 材料与方法

（1）供试材料

莺歌风梨品种“彩苞凤梨”成熟植株新长出的侧芽，取自广西亚热带作物研究所温控大棚。

（2）试验方法

①外植体灭菌

取生长健壮的侧芽先用流水冲洗干净，然后用中性洗洁精水浸泡30min，再置于水龙头下轻剥小芽上的叶片，保留3～4片幼叶，流水冲洗1～2h，带入接种室，在无菌操作台上采用不同的消毒剂和不同的操作方法进行灭菌消毒。接种前切除茎端基部与消毒液接触部分，以未添加任何植物调节剂的ms为基本培养基。

②分化培养

将在初代培养基上无污染的外植体材料接种到增殖培养基上。增殖培养基以ms为基本成分，添加3og/l一级蔗糖以及不同浓度的6-ba植物生长调节物质，琼脂粉7.5g/l，ph=5.8。培养周期为1个月。

③继代培养

将诱导出来的不定芽丛切成单芽和小芽团(2～4个小芽)接种于继代增殖培养基上，继代培养基以ms为基本培养基添加不同浓度的6-ba和naa。60天统计增殖情况。

④壮苗及生根培养

将经过多次继代培养的丛生芽中2～3cm长小芽切下转移到不同激素和浓度配比的1/2ms+0.2%活性炭的培养基中诱导生根。60天统计生根率，观察生根情况。

以上各阶段的组织培养均在室内进行，培养温度为(28±2)℃，光照强度约为1500lx，光照时间为16小时/天。

2. 不定芽的诱导分化

将在初次培养基中表现未受污染的茎顶端外植体转接到含有naa0.5mg/l和添加不同浓度的6-ba的ms培养基中，30天后莺歌凤梨茎顶端外植体的培养结果是，在所使用的6-ba浓度范围内，莺歌凤梨茎顶端都有不同程度的萌发。当6-ba浓度为1mg/l时，外植体的芽诱导率为55%，同时茎顶端多形成较粗的单芽，在芽的基部只诱导出1～2个侧芽，小芽生长快。随着6-ba浓度的升高，外植体的萌发率也有所上升，顶芽基部逐渐膨大形成密集的丛芽团，丛芽生长较快；当6-ba浓度为5mg/l时，芽诱导率为85%，外植体的萌发率并没有进一步提高，芽的生长也受到抑制，形成的簇芽团致密，同时小芽生长极为缓慢。#p#分页标题#e#

3. 芽的继代培养

将诱导出来的丛芽团切割成小块芽团和单芽2种方式，继代于增殖培养基上，试验结果表明：在不添加任何激素的培养基中，单芽并没有新的小芽形成，丛芽的增殖倍数为0.1也只是丛芽块原来所带的短小的芽伸长形成。而添加有激素的培养基均能使单芽或丛芽诱导出多少不等的小芽。在相同的培养基上，丛芽诱导增殖倍数要高于单芽的诱导，在为1.0mg/l和6-ba为2.0mg/l2种培养基中培养，芽丛的分化随6-ba浓度的增加而增加，丛芽诱导增殖的倍数分别为3.0和4.5，而单芽的增殖倍数分别为0.5和1.5，丛芽增殖的倍数为单芽的3～6倍。另外，从苗的生长情况看，6-ba不仅影响芽的增殖，同时对芽的伸长生长也有较大影响。单芽或丛芽在含有较高浓度的6-ba培养基中，芽的长度分别为3.5cm和2.5cm，而在无激素培养基中芽的均长为2cm。虽然单芽的长势较好，平均长度达3cm，但增殖率较低，部分单芽并未能诱导出侧芽，而丛生芽在适合的培养基中不仅小芽的平均长度好而且增殖率高。由此可以看出，在莺歌凤梨芽的增殖过程中以丛芽为接种方式明显高于以单芽为接种方式。

4. 壮苗及生根培养

将长度达3em以上的单芽分别接种于1/2ms+naa1.0+iba0.5和1/2ms+naa1.0+6－ba0.52种培养基中进行培养，2个月后观察其生根情况是，在添加naa与iba2种激素的培养基中，莺歌凤梨的生根率有83.3%，大多数单芽均只长出一条根且根较细、短。而在添加naa、iba与6-ba3种激素的培养基中，莺歌凤梨的生根率达100%，每株单芽均能分化出2～3条较粗长的根。由此可以看出，低浓度的6-ba在诱导莺歌凤梨根的分化与生长的过程中具有促进作用。

应用范围

因其花苞色彩艳丽，为主要的观赏部位。斑叶品种的叶片，鲜绿明亮，并布有明显的彩色斑纹，也具有迷人的观赏价值。同时由于莺歌凤梨植株低矮，小巧玲珑，花叶均艳丽美观，为家庭室内养花珍稀佳品，具有很高的观赏价值。